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工艺研究

工程大肠杆菌异源表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶的诱导工艺研究

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摘要

以异源表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶(D-psicose 3-epimerase,缩写为DPEase)的工程大肠杆菌为出发菌株,在5L发酵罐培养的基础上,系统研究了大肠杆菌异源表达DPEase酶的诱导工艺。通过依次考察诱导时间点、诱导温度、诱导pH和诱导剂用量对工程大肠杆菌生长和DPEase酶活(单位时间内的转化率)的影响,综合考虑能耗和发酵周期,确定相应的最佳控制点,系统优化诱导条件。结果表明:指数生长期进行诱导,诱导前培养温度由37℃降至25℃、pH恒定7.0、IPTG诱导剂添加终浓度为0.5 mmol/L,可以理想平衡菌体生长和蛋白酶表达,反应30 min的DPEase酶平衡转化率达到28%左右,达到已公开报道的平均水平,为后续的生物转化工艺摸索提供原料供应。 

本文引用格式

周卫强,何太波,唐堂,汤维涛,吕哲,郭元亨,王靖,王小艳,彭超,陈博,李义,佟毅 . 工程大肠杆菌异源表达D-阿洛酮糖3-差向异构酶的诱导工艺研究[J]. 发酵科技通讯, 2019 , 48(4) : 192 -196 . DOI: 10.16774/j.cnki.issn.1674-2214.2019.04.001

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