利用大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ＢＬ２１（ＤＥ　３）克隆并表达来源于枯草芽孢杆菌Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＡＴＣＣ　１５２４５的Ｌ－氨基酸连接酶（Ｌ－ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｌｉｇａｓｅ，Ｌａｌ）基因，采用Ｎｉ－ＮＡＴ亲和层析法分离纯化得到重组的Ｌａｌ，并以Ｌ－丙氨酸和Ｌ－谷氨酰胺为底物制备Ｌ－丙氨酰－Ｌ－谷氨酰胺（丙谷二肽）．Ｌａｌ属于ＡＴＰ依赖酶，研究结果表明其最适反应温度和ｐＨ 值分别为３７℃和９．０，连续催化反应１４ｈ可催化等摩尔的底物氨基酸（３０ｍｍｏｌ／Ｌ）生成２２．４ｍｍｏｌ／Ｌ的丙谷二肽，最高摩尔转化率可达７４．７％．成功克隆表达了枯草芽孢杆菌的Ｌ－氨基酸连接酶，并将其应用于丙谷二肽的酶法合成，研究结果可为丙谷二肽的生物制造奠定理论基础．

Ｌ－ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｌｉｇａｓｅ（Ｌａｌ）ｇｅｎｅ　ｆｒｏｍ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ　ＡＴＣＣ　１５２４５ｗａｓ　ｃｌｏｎｅｄ　ａｎｄ  ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ｉｎ　Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ＢＬ２１（ＤＥ　３）．Ｔｈｅ　ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　Ｌａｌ　ｗａｓ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ　ｂｙ　Ｎｉ－ＮＡＴ．Ｌａｌａｎｙｌ－Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ　ｗａｓ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄ　ｂｙ　ｐｕｒｉｆｉｅｄ　Ｌａｌ　ｕｓｉｎｇ　Ｌ－ａｌａｎｉｎｅ　ａｎｄ　Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ　ａｓ　ｔｈｅ ｓｕｂｓｔｒａｔｅ．Ｌａｌ　ｉｓ　ａｎ　ＡＴＰ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｅｎｚｙｍｅ，ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｒｅａｃｔｉｏｎ  ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｐＨ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　Ｌａｌ　ｗａｓ　３７ ℃ ａｎｄ　９．０，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．３０ ｍｍｏｌ／Ｌ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄｓ  ｓｕｂｓｔｒａｔｅ　ｗａｓ　ｃｏｎｖｅｒｔｅｄ　ｉｎｔｏ　２２．４ｍｍｏｌ／Ｌ　Ｌ－ａｌａｎｙｌ－Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ　ｂｙ　１４ｈｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ　ｃａｔａｌｙｔｉｃ  ｒｅａｃｔｉｏｎ，ｔｈｅ　ｍａｘｉｍｕｍ　ｍｏｌａｒ　ｙｉｅｌｄ　ｒｅａｃｈｅｄ　７４．７％．Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ，Ｌａｌ　ｆｒｏｍ　Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ＡＴＣＣ　１５２４５ｗａｓ　ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ　ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ａｎｄ　ａｐｐｌｉｅｄ　ｔｏ　Ｌ－ａｌａｎｙｌ－Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ  ｒｅｓｕｌｔｓ　ｃａｎ　ｌａｙ　ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ　ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｂｉｏ－ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ　ｏｆ　Ｌ－ａｌａｎｙｌ－Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ．