研究报告
谢丽萍,应向贤,王一芳,郑建永
2013, 42(3): 13-17.
将重组质粒pET30a-bme转化至表达宿主菌E.coli BL21(DE3),在终浓度0.2mmol/L的IPTG诱导下,实现BME功能性表达,利用亲和层析纯化表达产物,并研究其酶学性质。分离纯化的重组酯酶经SDS-PAGE电泳检测为单一条带,其分子量约为41.5 kDa。该酶最适反应温度和pH分别为70℃与7.5,比酶活为200 U/mg。BME能耐受低浓度(1mmol/L)的Na+,Zn2+,Ca2+,Mg2+,Mn2+和EDTA等,但较高浓度(5 mmol/L)的Na+,Zn2+,Ca2+对酶活有一定抑制作用。体积分数在0%80%范围,BME对甲醇具有良好的耐受性,而体积分数在50%时Triton X-100对其酶活有一定抑制作用。同时发现该酶对4-氯-3-羟基丁酸乙酯具有立体选择性,拆分反应的转化率和底物e.e.值分别为50%和70%。