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• 2017年, 46卷, 第2期
  刊出日期：2017-05-25

    

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  研究报告
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  应用开发
  

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研究报告
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  研究报告

  化学－酶法不对称氢化柠檬醛合成（Ｒ）－香茅醛

  应向贤，孟淑敏，程　峰，余世华，张　洁，汪　钊

  2017, 46(2): 65-69. https://doi.org/10.16774/j.cnki.issn.1674-2214.2017.02.001

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  烯醇还原酶ＯＹＥ２催化（Ｅ）－或（Ｚ）－柠檬醛不对称氢化时，其氢化产物的手性是互补的．因
  而，以（Ｅ／Ｚ）－柠檬醛为底物时产物ｅ．ｅ．值往往很低．拟将酶法不对称氢化反应与氨基酸催化的底
  物异构化反应相偶联，从而提高产物（Ｒ）－香茅醛的ｅ．ｅ．值．对氨基酸催化的异构化反应进行了条
  件优化，最优氨基酸为甘氨酸，最优添加浓度为１．０ｍｏｌ／Ｌ，最优ｐＨ 为７．０．在优化条件下反应
  １１ｈ，偶联底物异构化反应时的（Ｒ）－香茅醛ｅ．ｅ．值和得率分别为７５．０６％和９１．８４％，比对照分别
  提高了２７．６２％和２３．９０％．
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  ＥＳＩ－Ｑ－ＴＯＦ－ＭＳ／ＭＳ用于碳青霉烯类抗生素及其中间体质谱裂解机理研究

  苏　凤，孙子晴，肖钦钦，梁现蕊

  2017, 46(2): 70-76+99. https://doi.org/10.16774/j.cnki.issn.1674-2214.2017.02.002

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  采用电喷雾－四极杆－飞行时间串联质谱（ＥＳＩ－Ｑ－ＴＯＦ－ＭＳ／ＭＳ），在正离子模式下，对美罗培南等碳青霉烯类抗生素及其合成中间体共８种化合物的裂解规律进行了探讨．实验结果显示碳青霉烯类抗生素在该质谱条件下易形成［Ｍ＋Ｈ］＋ 离子，其合成中间体则易观察到［Ｍ＋Ｎａ］＋ 离子．该８种化合物裂解途径相似，主要为分子内脱羧基反应、四元内酰胺环裂解反应及侧链结构中Ｃ—Ｓ键的裂解反应．
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  研究报告

  ＩＰＴＧ添加时机对大肠杆菌产α－ 酮基丁酸的影响

  李　娟，齐俊生，王　婷，毛　倩，韩　超，李燕军

  2017, 46(2): 77-82. https://doi.org/10.16774/j.cnki.issn.1674-2214.2017.02.003

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  探究ＩＰＴＧ不同添加时间对大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ＴＨＲＤ／ｐＷＳＫ２９－ｉｌｖＡ 发酵生产α－酮基丁酸菌体生长、产酸、代谢副产物和耗糖的影响．摇瓶发酵结果表明：在菌体处于对数生长中后期，菌体ＯＤ６００值为１０～１５时，添加ＩＰＴＧ进行诱导，菌体生物量相对较高为６．５ｇ／Ｌ，α－酮基丁酸积累量最高达到１６ｇ／Ｌ，同时糖酸转化率较其他诱导时间高，且副产物乙酸含量明显降低．利用７．５Ｌ发酵罐对此诱导条件进行发酵验证，α－酮基丁酸质量浓度为２２ｇ／Ｌ，高于已有报道中８ｇ／Ｌ的生产水平．
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  研究报告

  利用重组枯草芽孢杆菌Ｌ－氨基酸连接酶合成丙谷二肽

  洪　翔，朱新雅，贾子樊，黄　晗，谭　旭，范晓光

  2017, 46(2): 83-87. https://doi.org/10.16774/j.cnki.issn.1674-2214.2017.02.004

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  利用大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ＢＬ２１（ＤＥ　３）克隆并表达来源于枯草芽孢杆菌Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌｉｓ ＡＴＣＣ　１５２４５的Ｌ－氨基酸连接酶（Ｌ－ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　ｌｉｇａｓｅ，Ｌａｌ）基因，采用Ｎｉ－ＮＡＴ亲和层析法分离纯化得到重组的Ｌａｌ，并以Ｌ－丙氨酸和Ｌ－谷氨酰胺为底物制备Ｌ－丙氨酰－Ｌ－谷氨酰胺（丙谷二肽）．Ｌａｌ属于ＡＴＰ依赖酶，研究结果表明其最适反应温度和ｐＨ 值分别为３７℃和９．０，连续催化反应１４ｈ可催化等摩尔的底物氨基酸（３０ｍｍｏｌ／Ｌ）生成２２．４ｍｍｏｌ／Ｌ的丙谷二肽，最高摩尔转化率可达７４．７％．成功克隆表达了枯草芽孢杆菌的Ｌ－氨基酸连接酶，并将其应用于丙谷二肽的酶法合成，研究结果可为丙谷二肽的生物制造奠定理论基础．
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  研究报告

  新型细胞活力检测ＥＺＭＴＴ法的研究

  张京京，阮奔放

  2017, 46(2): 88-91+106. https://doi.org/10.16774/j.cnki.issn.1674-2214.2017.02.005

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  研究四氮唑盐／甲臜类ＥＺＭＴＴ法检测细胞活力和增殖的应用并评价ＥＺＭＴＴ法的优势．评价ＥＺＭＴＴ法检测细胞增殖的准确性，对比ＥＺＭＴＴ法与ＷＳＴ－８的灵敏度、毒性及细胞活力长期跟踪的应用．研究表明：细胞量为３　０００～５００　０００时，在４ｈ内ＥＺＭＴＴ法信号值与细胞量成正比，且较现有产品ＷＳＴ－８检测试剂，ＥＺＭＴＴ法更灵敏、毒性更低，可实现长达７ｄ的细胞活力跟踪．０．０６％十二烷基硫酸钠或５０μｍｏｌ／Ｌ盐酸可中止ＥＺＭＴＴ反应．ＥＺＭＴＴ法有望成为更为优秀的新一代细胞活力检测方法．
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  研究报告

  手性农药在红曲菌发酵过程中的立体选择性行为研究

  刘银兰，陆跃乐，嘉晓勤

  2017, 46(2): 92-99. https://doi.org/10.16774/j.cnki.issn.1674-2214.2017.02.006

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  采用高效液相色谱－串联质谱联用技术，研究了手性农药腈菌唑、己唑醇在红曲菌液态发酵和红曲酒酿造过程中的立体选择性降解情况，以及对红曲菌产酶（糖化酶、纤维素酶）和典型代谢产物（红曲色素、桔霉素）的影响．结果表明，腈菌唑、己唑醇的对映异构体的降解速率基本一致，无选择性降解现象发生．腈菌唑、己唑醇的外消旋体及对映异构体对红曲菌产酶和代谢物呈现一定的差异性，其中，在５，０．５ｍｇ／Ｌ己唑醇条件下，红曲菌产酶及代谢物表现出显著性变化，且（＋）－己唑醇
  显著性大于（－）－己唑醇，５ｍｇ／Ｌ质量浓度下显著性大于０．５ｍｇ／Ｌ；在０．０５ｍｇ／Ｌ己唑醇条件下，红曲菌产酶及次级代谢均不存在显著性差异．此外，不同质量浓度的腈菌唑外消旋体及对映异构体对红曲菌产酶及次级代谢也不存在显著性影响．
综述
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  综述

  假交替单胞菌遗传操作系统的研究进展

  羊燕燕，裘娟萍，余志良

  2017, 46(2): 100-106. https://doi.org/10.16774/j.cnki.issn.1674-2214.2017.02.007

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  假交替单胞菌能产生多种胞外活性物质，赋予其重要的基础研究和应用研究价值．目前已有多株假交替单胞菌完成基因组测序．基因组序列分析揭示不同的假交替单胞菌具有产生不同活性代谢产物的能力．假交替单胞菌遗传操作体系欠成熟，这极大地限制了假交替单胞菌的研究与应用．主要对近十多年来假交替单胞菌遗传操作系统研究进展进行综述，包括感受态制备，穿梭载体、自杀敲除载体及筛选标记的成功应用，以期为假交替单胞菌遗传操作系统的发展提供参考．
  
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  综述

  调控脂肪酸合成植物转录因子的研究进展

  闵文莉，曹喜涛，季更生，张国政

  2017, 46(2): 107-112. https://doi.org/10.16774/j.cnki.issn.1674-2214.2017.02.008

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  转录因子是植物特有的一类调节蛋白，对植物生长发育及抗逆性等有重要的作用，尤其是调控脂肪酸合成与油脂积累的转录因子，对生产生物能源起到关键作用，利用转录因子提高作物产油量已逐渐受到青睐，为未来获得高产油脂的优良作物作铺垫．对与脂肪酸合成相关的几种主要转录因子进行了概述，阐释其结构、功能及研究进展等，并对转录因子的应用进行了展望，以期为更多转录因子的结构和功能机制的研究提供基础．
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  综述

  生物法制备木糖醇的研究进展

  杨　波，许　韦，贾东旭，金利群

  2017, 46(2): 113-117+120. https://doi.org/10.16774/j.cnki.issn.1674-2214.2017.02.009

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  木糖醇是一种存在于自然的五碳糖醇，在医药、食品和化工等领域具有广泛应用．目前，工业上制备木糖醇的方法主要是化学加氢法，生物法制备木糖醇具有反应条件温和、环境污染小等优势，已经受到了广泛的关注．对微生物发酵法和酶催化法制备木糖醇以及制备过程中所涉及到的一些方法进行了综述，并对未来在提高木糖醇产量方面的一些着手点进行展望．
  
应用开发
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  应用开发

  利用脱色树脂提高味精收得率的研究及应用

  冯文清

  2017, 46(2): 118-120. https://doi.org/10.16774/j.cnki.issn.1674-2214.2017.02.010

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  随着消费者对食品质量的要求越来越高，小包装味精的洁白度及颗粒形状越来越受关注．各味精生产厂家在成本允许下，都在想办法提高味精的洁白度和通透性，以获得消费者的认可及喜爱，从而获得更多的销量．通过利用大孔强碱型脱色树脂离交新工艺来解决味精中和液和味精母液的脱色问题，提高了味精的洁白度和母液循环率，提高了味精精制收得率，降低了味精的生产成本．同时，由于新工艺采用的是盐水再生，盐水可循环利用，生产清洁环保，具有良好的经济效益和社会效益．
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  应用开发

  红外－热风耦合干燥技术对毛虾品质的影响

  周　垚，张建友

  2017, 46(2): 121-128. https://doi.org/10.16774/j.cnki.issn.1674-2214.2017.02.011

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  利用红外－热风耦合干燥技术研究了干燥温度、辐射距离和物料载量对毛虾品质的影响．通过氨基酸自动分析仪研究了不同干燥温度下毛虾游离氨基酸的质量分数并分析呈味效果，采用电子固相微萃取气相色谱质谱（Ｓｏｌｉｄ　ｐｈａｓｅ　ｍｉｃｒｏｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｇａｓ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，ＳＰＭＥ－ＧＣ－ＭＳ）联用技术分析不同干燥温度下毛虾的挥发性成分．结果表明：结合色差和ＴＢＡ值，干燥温度６０℃、物料载量１．５ｋｇ／ｍ２ 和辐射距离１５ｃｍ 可选为最适干燥条件．经５０，６０，７０，８０℃干燥后毛虾的游离氨基酸含量分别增加了２８２％，２６７％，２５７％，２２２％，对呈味贡献较大的主要是精氨酸（Ａｒｇ）、谷氨酸（Ｇｌｕ）、丙氨酸（Ａｌａ）、缬氨酸（Ｖａｌ）和蛋氨酸（Ｍｅｔ），且随着温度升高质量分数逐渐降低．在鲜样和经５０，６０，７０，８０℃干燥后毛虾中确定了１９，５４，５４，５５，４８种挥发性成分，干燥后烷烃类物质、醇类物质和含氮化合物增加明显．